
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DMXL2CRISPR激活质粒(h) | sc-417505-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
DMXL2CRISPR激活质粒(h2) | sc-417505-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
DMXL2(Dmx-like 2)编码一种含有大量 WD 重复序列的支架蛋白,参与囊泡运输和受调控的胞吐作用,从而支持分泌区室和突触区室的膜动态过程。DMXL2 通过协调内膜系统通路中的蛋白—蛋白相互作用,与神经元和内分泌细胞功能相关,包括将囊泡成熟、对接与释放耦联起来的过程。DMXL2 表达或功能的改变与神经发育相关表型以及生殖/内分泌失调有关,因此在研究人类细胞中分泌通路的调控方面具有重要意义。作为一种广泛表达的膜运输调控因子,DMXL2 常在突触生物学、激素分泌和细胞稳态等模型研究中被考察。
DMXL2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性DMXL2的表达。
DMXL2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的DMXL2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于DMXL2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性DMXL2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的DMXL2位点,并能够研究内源性位点上依赖于DMXL2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在DMXL2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟DMXL2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。