Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DHS双切口酶质粒(h): sc-402858-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DHS 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DHS双切酶质粒（h）和DHS双切酶质粒（h2）编码针对DHPS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DHS: sc-365077，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DHS双切口酶质粒(h) | sc-402858-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DHS双切口酶质粒(h2) | sc-402858-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 DHPS 基因编码去氧海普新合成酶（deoxyhypusine synthase，DHS），这是一种必需的 NAD 依赖性酶，负责催化海普新化（hypusination）的第一步：将亚精胺（spermidine）上的氨丁基基团转移到 eIF5A 上，生成去氧海普新（deoxyhypusine）。这种翻译后修饰对 eIF5A 的活性必不可少，并支持翻译延长、蛋白质合成调控以及细胞周期进程，从而将多胺代谢与蛋白稳态（proteostasis）联系起来。DHS 的功能与调控细胞生长和应激反应的通路相交叉，而 DHPS–eIF5A 海普新化轴的扰动与增殖失衡及神经发育相关表型有关。由于海普新化会影响对难以合成序列/结构基序的选择性翻译，DHPS 常被用于研究代谢重编程、蛋白毒性应激，以及维持组织稳态的机制。
DHS 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DHPS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DHPS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DHPS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DHPS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。