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DGAT2双切口酶质粒(h) | sc-416229-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DGAT2双切口酶质粒(h2) | sc-416229-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DGAT2(二酰甘油O-酰基转移酶2)编码一种与内质网相关的酶,可利用脂酰辅酶A对二酰甘油进行酰基化,催化三酰甘油合成中最后且不可逆的关键步骤。作为中性脂质生成的核心组分,DGAT2支持脂滴的生物发生,并与甘油脂代谢、脂肪酸通量及能量储存通路相互衔接。DGAT2活性改变与肝脏和脂肪组织脂质处理失衡相关,并在代谢性疾病机制研究中受到关注,包括脂肪变性、与胰岛素抵抗相关的脂质重塑以及肥胖相关表型等。DGAT2也常被用作功能节点,用于探究脂质过载条件下的脂毒性应激反应与内质网稳态调控。
DGAT2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DGAT2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DGAT2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DGAT2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DGAT2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。