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DGAT1慢病毒激活颗粒(h) | sc-401735-LAC | 200 µl | CNY3422.00 | |||
DGAT1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-401735-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
DGAT1(二酰基甘油O-酰基转移酶1)是一种位于内质网膜上的酶,可利用酰基辅酶A(acyl-CoA)作为底物对二酰基甘油进行酰化,从而催化三酰甘油合成途径中最后且不可逆的关键步骤。它处于脂滴生物发生、肠道脂质吸收与细胞能量储存的交汇点,影响甘油三酯的周转以及脂质信号分子库的构成。DGAT1活性会影响脂肪酸的处理方式和脂毒性应激反应,常用于研究与肥胖、胰岛素抵抗、非酒精性脂肪性肝病以及血脂异常相关的代谢通路重塑。在癌症生物学和炎症研究中,依赖DGAT1的中性脂质储存也常被用来探究细胞如何缓冲过量脂肪酸并调控膜脂组成。
DGAT1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DGAT1 表达。
DGAT1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DGAT1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DGAT1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DGAT1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。