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Desmuslin双切口酶质粒(m) | sc-433269-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Desmuslin双切口酶质粒(m2) | sc-433269-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Synm 编码 desmuslin,这是一种与中间丝相关的蛋白质,富集于 Z 盘,在横纹肌中参与维持细胞骨架完整性并介导机械力传导。在小鼠中,desmuslin 与肌营养不良蛋白–糖蛋白复合体(dystrophin–glycoprotein complex, DGC)及相关的肌膜支架成分相互作用,从而协调肌原纤维的组织、力量传递以及对压力的响应性重塑。这些功能使 Synm 与调控肌细胞结构、黏附信号传递以及收缩装置稳定性维持的通路相联系。中间丝网络与 Z 盘相关蛋白的失调与心肌病和骨骼肌退行性变的多种模型密切相关,因此 Synm 是解析细胞骨架失效机制的一个有用靶点。
Desmuslin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Synm 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Synm内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Synm的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Synm基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。