非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DermcidinCRISPR激活质粒(h): sc-401346-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Dermcidin CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Dermcidin CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Dermcidin CRISPR 激活质粒 (h) 和 Dermcidin CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 DCD 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Dermcidin: sc-398429，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DermcidinCRISPR激活质粒(h) | sc-401346-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
DermcidinCRISPR激活质粒(h2) | sc-401346-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 DCD 基因编码 dermcidin（皮肤素），这是一种分泌型肽前体，在小汗腺中高表达，并可经蛋白水解加工生成具有抗菌作用及生物活性的片段。来源于 dermcidin 的肽通过破坏微生物膜并塑造皮肤与黏膜的微环境，参与先天性屏障防御；此外，其他片段还与细胞应激反应和生存信号传导有关。已有报道显示，在多种炎症状态及多种癌症类型中 DCD 表达发生改变，并与细胞增殖、氧化应激耐受以及肿瘤—微环境相互作用的变化相关。这些特性使 DCD 成为研究上皮稳态、分泌肽生物学以及与疾病相关重塑有关的微环境调控的一个重要节点。
Dermcidin CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性DCD的表达。
Dermcidin CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的DCD基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于DCD转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Dermcidin表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的DCD位点，并能够研究内源性位点上依赖于Dermcidin的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在DCD表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Dermcidin通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。