
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DENND4B双切口酶质粒(h) | sc-411384-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
DENND4B 编码一种含 DENN 结构域的鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF),用于调控 Rab 家族小 GTP 酶,从而支持膜转运与内体回收。DENND4B 通过调节 Rab 的活化状态,参与囊泡系留/融合等动力学过程,进而影响受体周转、营养转运体定位以及来自内膜系统区室的信号输出。这些转运功能与调控细胞骨架组织、细胞极性和应激适应性反应的通路相互交叉,使 DENND4B 成为研究细胞迁移与信号衰减的重要节点。在膜转运与受体信号发生紊乱的疾病背景中(包括与癌症相关的细胞重塑),与 DENND4B 相关的内体运输程序的异常调控也已被开展研究。
DENND4B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DENND4B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DENND4B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DENND4B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DENND4B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。