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DDX15双切口酶质粒(h) | sc-403959-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DDX15双切口酶质粒(h2) | sc-403959-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DHX15(DDX15)编码一种 DEAH-box RNA 解旋酶,可在前体 mRNA 剪接及更广泛的 RNA 加工过程中重塑 RNA–蛋白复合物。DDX15 在剪接体相关通路中发挥作用,支持内含子去除、RNA 监控以及与细胞周期调控和应激反应程序相关转录本的成熟。通过影响剪接位点选择与转录本保真性,DHX15 能在多种细胞环境中改变蛋白质组组成及信号输出。涉及 DHX15 的 RNA 解旋酶活性与剪接因子网络的失调,已与基因表达状态改变相关,而这些改变与增殖及神经发育表型有关,因此 DHX15 是开展 RNA 代谢机制研究的一个有用节点。
DDX15 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DHX15 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DHX15内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DHX15的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DHX15基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。