Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDIT3/CHOP/GADD153双切口酶质粒(h): sc-400051-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DDIT3/CHOP/GADD153 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DDIT3/CHOP/GADD153双切酶质粒（h）和DDIT3/CHOP/GADD153双切酶质粒（h2）编码针对DDIT3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DDIT3/GADD153/CHOP: sc-7351，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DDIT3/CHOP/GADD153双切口酶质粒(h) | sc-400051-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DDIT3/CHOP/GADD153双切口酶质粒(h2) | sc-400051-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DDIT3 编码转录因子 CHOP（GADD153），这是一种可由应激诱导的 bZIP 蛋白，能与 C/EBP 家族成员形成异源二聚体，在细胞应激过程中重塑基因表达。CHOP 是未折叠蛋白反应（UPR）的核心效应分子，整合 PERK–eIF2α–ATF4 信号通路，在内质网应激条件下调控细胞凋亡、氧化还原稳态以及蛋白质稳态（proteostasis）。除内质网应激外，DDIT3 还参与与营养缺乏、氧化应激和炎症信号相关的整合性应激反应通路，影响细胞命运决定与分化程序。CHOP 活性失调与代谢功能紊乱、神经退行性疾病模型、炎症性组织损伤以及肿瘤相关情境有关，其中包括与黏液样脂肪肉瘤相关的 FUS‑DDIT3 融合基因；因此，DDIT3 是研究应激适应性转录网络机制的重要关键节点。
DDIT3/CHOP/GADD153 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DDIT3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DDIT3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DDIT3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DDIT3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。