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DCAMKL1双切口酶质粒(h) | sc-402160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DCAMKL1双切口酶质粒(h2) | sc-402160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCLK1(DCAMKL1)编码一种与微管相关的丝氨酸/苏氨酸激酶,可将 doublecortin 样的微管结合能力与激酶信号整合起来,从而调控细胞骨架动态、神经元迁移以及神经突起生长。在上皮细胞环境中,DCLK1 常被用作簇状细胞(tuft cells)的标志物,并与决定细胞命运、细胞运动性及应激适应性信号等程序相关。已有报道的通路关联包括微管重塑、MAPK 相关信号以及与分化耦联的转录状态调控。多种肿瘤类型和炎症背景中均有 DCLK1 表达失调的描述,这支持对干性样表型、侵袭以及微环境相互作用等机制的研究,但不暗示临床结局。
DCAMKL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DCLK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DCLK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DCLK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DCLK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。