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DBP双切口酶质粒(h) | sc-403069-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DBP双切口酶质粒(h2) | sc-403069-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 GC 基因编码维生素 D 结合蛋白(DBP),这是一种在血浆中含量极高的糖蛋白,负责结合并转运维生素 D 代谢物,并参与机体对钙、磷稳态的系统性调控。除运输维生素 D 外,DBP 还参与肌动蛋白清除(actin scavenging),并可通过调节细胞外肌动蛋白的清除以及对白细胞反应的影响,进而影响免疫与炎症过程。关于 GC/DBP 的水平差异及其结合特性的变异,已在骨与矿物质相关疾病、代谢表型以及炎症性疾病等背景下得到研究。在科研中,GC 是一个便于操作的关键节点,可用于探究维生素 D 信号传导动态、内分泌串扰以及细胞外蛋白处理机制。
DBP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。