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Daxx双切口酶质粒(h) | sc-400686-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Daxx双切口酶质粒(h2) | sc-400686-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DAXX 编码 Daxx,这是一种多功能核蛋白,兼具转录共调节因子与染色质相关因子的作用。它最为人熟知的功能是与 ATRX 形成复合体,在重复性异染色质及端粒区域沉积组蛋白变体 H3.3。通过与 PML 核小体以及多种转录因子的相互作用,Daxx 影响染色质组织、DNA 损伤应答以及应激诱导的信号通路。Daxx 还与细胞凋亡调控以及先天免疫和干扰素相关转录程序的调节有关。在多种疾病背景(包括癌症和神经发育相关表型)中,DAXX 功能或表达失调与表观遗传状态改变及基因组不稳定性相关。
Daxx 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DAXX 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DAXX内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DAXX的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DAXX基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。