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DAGLα双切口酶质粒(h) | sc-402826-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DAGLα双切口酶质粒(h2) | sc-402826-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DAGLA 编码二酰基甘油脂肪酶 α(DAGLα),这是一种与膜相关的丝氨酸水解酶,催化由二酰基甘油生成内源性大麻素 2-花生四烯酰甘油(2-AG)。通过调控 2-AG 的可用性,DAGLα 调节大麻素受体信号传导与突触可塑性,将磷脂代谢与神经调制信号网络联系起来。DAGLα 的活性与脂质第二信使通路相互衔接,其中包括依赖 PLC 的二酰基甘油周转,以及下游二十碳烷酸类/内源性大麻素之间的平衡。围绕 DAGLA 的内源性大麻素信号异常与脂质稳态失衡,已在神经发育与神经精神表型,以及更广泛的代谢与炎症生物学背景下得到研究。
DAGLα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DAGLA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DAGLA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DAGLA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DAGLA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。