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Dab2双切口酶质粒(m) | sc-419936-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dab2双切口酶质粒(m2) | sc-419936-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
无功能同源物2(Disabled homolog 2,Dab2)编码一种内吞适配蛋白,可通过与网格蛋白(clathrin)、AP-2以及磷脂相互作用,将货物受体连接到网格蛋白介导的内化机制。在小鼠细胞中,DAB2参与受体转运与信号衰减,通过调控受体可用性及下游信号强度,影响TGF-β和Wnt/β-连环蛋白等通路。它还参与上皮极性、细胞黏附和细胞骨架组织的维持,这些过程对发育模式形成与组织稳态至关重要。在实验模型中,DAB2表达或功能失调与分化状态改变及迁移表型相关,这些变化与肿瘤生物学以及纤维化或炎症性重塑具有相关性。
Dab2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Dab2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dab2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Dab2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Dab2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。