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Dab1双切口酶质粒(h) | sc-402167-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dab1双切口酶质粒(h2) | sc-402167-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
DAB1 编码 Disabled-1(Dab1),这是一种细胞内衔接蛋白,可将 Reelin 通路的信号向下游传递,从而在人体大脑发育过程中协调神经元迁移、大脑皮层分层以及神经突起生长。受体被激活后,Dab1 发生酪氨酸磷酸化,并作为支架招募 Src 家族激酶、PI3K–AKT 以及细胞骨架重塑等过程中的下游效应分子,以调控细胞定位与极性。DAB1 的活性还与内吞转运以及微管/肌动蛋白动力学相交织,将细胞外线索与黏附和运动性的改变联系起来。Reelin–DAB1 信号失调与多种神经发育及神经精神表型相关,因此 DAB1 是研究神经回路形成机制的一个有用靶点。
Dab1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DAB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DAB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DAB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DAB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。