Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
DAAO Antibody (B-3): sc-398757. Western blot analysis of DAAO expression in SK-N-MC (A), HEK293 (B) and HL-60 (C) whole cell lysates and human fetal liver tissue extract (D).
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DAAO双切口酶质粒(h): sc-402772-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DAAO 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DAAO双切酶质粒（h）和DAAO双切酶质粒（h2）编码针对DAO的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DAAO: sc-398757，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DAAO双切口酶质粒(h) | sc-402772-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DAAO双切口酶质粒(h2) | sc-402772-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 DAO 基因编码 D-氨基酸氧化酶（DAAO），这是一种位于过氧化物酶体的黄素蛋白，催化中性 D-氨基酸的氧化脱氨作用，将其转化为相应的酮酸并产生过氧化氢。该酶活性与氨基酸分解代谢、氧化还原稳态以及过氧化物酶体相关的活性氧（ROS）代谢相互衔接；在中枢神经系统中尤与调控 D-丝氨酸的可用性及其作为 NMDA 受体共激动剂的作用密切相关。DAO/DAAO 功能改变已在神经精神疾病和神经退行性疾病的生物学背景下被广泛研究，因为 D-丝氨酸周转与氧化应激通路的变化会影响突触信号传递。DAO 也常被用作研究过氧化物酶体酶的转运、黄素依赖性氧化反应化学以及细胞对过氧化物应答的代谢节点。
DAAO 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DAO 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DAO内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DAO的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DAO基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。