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Cytokeratin 19双切口酶质粒(h) | sc-400281-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cytokeratin 19双切口酶质粒(h2) | sc-400281-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
KRT19 编码细胞角蛋白19(cytokeratin 19),这是一种 I 型中间丝蛋白,有助于上皮细胞骨架的组织、细胞机械稳定性以及极性的维持。细胞角蛋白19参与角蛋白丝的组装与重塑过程,并与细胞黏附和细胞连接复合体相协调,从而影响上皮分化与应激反应。KRT19 表达的改变常被用作分子指标,用于提示上皮谱系以及在不典型增生、与侵袭相关的表型转换和转移性播散过程中出现的细胞状态变化。在人类疾病研究中,KRT19 常用于肿瘤异质性、上皮标志物调控以及与迁移和存活相关的信号程序等方面的研究。
Cytokeratin 19 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KRT19 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KRT19内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KRT19的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KRT19基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。