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Cytokeratin 16双切口酶质粒(h) | sc-403138-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cytokeratin 16双切口酶质粒(h2) | sc-403138-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
KRT16 编码细胞角蛋白 16(cytokeratin 16),这是一种 I 型中间丝蛋白,可与 II 型角蛋白形成异源二聚体,从而在复层上皮中构建角蛋白细胞骨架。细胞角蛋白 16 会在表皮处于激活状态时迅速诱导表达,帮助细胞在屏障应激和创伤相关程序中增强机械韧性、促进细胞骨架重塑,并协调角质形成细胞的增殖与迁移。它还参与黏附与应激反应过程,包括细胞骨架–桥粒的组织以及角蛋白网络动力学,从而塑造并维持上皮完整性。KRT16 表达或丝状结构组装的失调与皮肤高增殖表型及角化障碍相关,因此是研究上皮应激信号与分化相关细胞骨架重塑的有用靶点。
Cytokeratin 16 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KRT16 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KRT16内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KRT16的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KRT16基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。