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cystatin S双切口酶质粒(h) | sc-416501-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cystatin S双切口酶质粒(h2) | sc-416501-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CST4 编码胱抑素 S(cystatin S),这是一种分泌型的 2 型胱抑素,可作为对乳头蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶的可逆性抑制剂,帮助在细胞外及黏膜环境中维持蛋白水解的平衡。通过调节组织蛋白酶(cathepsin)的活性,胱抑素 S 参与蛋白酶—抗蛋白酶稳态,从而影响上皮屏障的维持、抗微生物防御以及炎症信号传导。胱抑素/组织蛋白酶动态的改变与口腔及上消化呼吸道相关疾病中组织重塑和免疫反应失调有关。因此,CST4 常用于研究“分泌性蛋白酶调控—黏膜免疫—上皮应激反应”相关通路。
cystatin S 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CST4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CST4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CST4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CST4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。