Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
cystatin C Antibody (T12): sc-73879. Western blot analysis of cystatin C expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human cystatin C transfected: sc-111929 (B) 293T whole cell lysates.
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cystatin C双切口酶质粒(h): sc-402420-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cystatin C 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- cystatin C双切酶质粒（h）和cystatin C双切酶质粒（h2）编码针对CST3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cystatin C: sc-515732，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cystatin C双切口酶质粒(h) | sc-402420-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cystatin C双切口酶质粒(h2) | sc-402420-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CST3 编码胱抑素C（cystatin C），这是一种分泌型的II型半胱氨酸蛋白酶抑制剂，能够强力抑制溶酶体及细胞外的半胱氨酸蛋白酶（如组织蛋白酶cathepsins），从而在组织重塑、抗原加工以及炎症微环境中限制蛋白水解。通过平衡cathepsin活性，胱抑素C有助于调控细胞外基质周转、细胞迁移，以及与免疫信号传导和细胞稳态相关的内吞-溶酶体蛋白酶网络。CST3表达或胱抑素C丰度的改变与神经退行性过程、淀粉样蛋白相关病理，以及血管与肾脏生物学有关，因此常被用作研究蛋白质稳态与屏障功能的分子读出指标。这些特征使CST3成为在中枢神经系统及外周系统中探究“蛋白酶–抗蛋白酶”平衡的一个有用节点。
cystatin C 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CST3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CST3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CST3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CST3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。