
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CysLT1 ReceptorCRISPR激活质粒(h) | sc-416516-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
CysLT1 ReceptorCRISPR激活质粒(h2) | sc-416516-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
CYSLTR1 编码人类半胱氨酰白三烯受体 1(CysLT1 受体),这是一种 G 蛋白偶联受体(GPCR),可结合 LTC4、LTD4 和 LTE4,将炎症性脂质介质的信号传递到细胞内。受体被激活后主要与 Gq/11 偶联,进而刺激磷脂酶 C 信号通路、动员细胞内 Ca2+,并启动与 MAPK 和 NF-κB 相关的下游转录程序,从而调控趋化、血管通透性以及平滑肌收缩功能。CYSLTR1 的活性与花生四烯酸/白三烯生物合成通路相互交叉,并在炎症组织中塑造白细胞与基质细胞之间的通讯。CysLT1 受体信号失调与气道炎症及重塑、过敏反应以及更广泛的免疫介导性疾病相关,因此可作为炎症研究中的关键机制节点。
CysLT1 Receptor CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CYSLTR1的表达。
CysLT1 Receptor CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CYSLTR1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CYSLTR1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CysLT1 Receptor表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CYSLTR1位点,并能够研究内源性位点上依赖于CysLT1 Receptor的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CYSLTR1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CysLT1 Receptor通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。