非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CYP27B1 抗体 (G-5): sc-515903. Y79 全细胞裂解液 (A) 和人肾组织提取物 (B) 中 CYP27B1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CYP27B1双切口酶质粒(h): sc-401155-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CYP27B1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CYP27B1双切酶质粒（h）和CYP27B1双切酶质粒（h2）编码针对CYP27B1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CYP27B1: sc-515903，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CYP27B1双切口酶质粒(h) | sc-401155-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CYP27B1双切口酶质粒(h2) | sc-401155-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CYP27B1 编码线粒体定位的 25-羟维生素 D-1α-羟化酶，这是将 25-羟维生素 D 转化为活性激素 1,25-二羟维生素 D（骨化三醇，calcitriol）的关键酶。通过调控骨化三醇的丰度，CYP27B1 调节维生素 D 受体（VDR）信号程序，从而影响钙、磷稳态、骨矿化，以及免疫细胞和上皮细胞中的广泛转录网络。其酶活将固醇代谢与内分泌信号及线粒体氧化还原过程连接起来，并在下游影响细胞分化、炎症水平与屏障生物学。CYP27B1 的表达或功能失调与维生素 D 代谢障碍相关，并已在多种研究背景中被探讨，包括骨骼表型、自身免疫易感性、慢性炎症以及肿瘤微环境信号的改变等。
CYP27B1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CYP27B1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYP27B1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CYP27B1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CYP27B1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。