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CYP1A2双切口酶质粒(m) | sc-419898-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CYP1A2双切口酶质粒(m2) | sc-419898-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cyp1a2 基因编码细胞色素 P450 酶 CYP1A2,这是一种微粒体单加氧酶,能够氧化多种内源性与外源性底物,并有助于维持化学稳态。其表达受配体激活的转录程序调控,其中尤以芳香烃受体(AhR)通路最为突出,将环境暴露与可诱导的药物代谢能力联系起来。CYP1A2 活性还参与肝脏氧化还原平衡,并可在生物转化过程中影响反应性代谢物的生成以及氧化应激反应。因此,Cyp1a2 功能或调控的改变与小鼠模型中毒物易感性、药代动力学差异以及基因–环境互作等研究密切相关。
CYP1A2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cyp1a2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cyp1a2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cyp1a2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cyp1a2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。