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CYP1A1双切口酶质粒(m) | sc-419897-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CYP1A1双切口酶质粒(m2) | sc-419897-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cyp1a1 编码细胞色素 P450 1A1(CYP1A1),这是一种微粒体单加氧酶,催化外源性化合物和内源性底物的氧化代谢,包括对多环芳烃的生物活化与解毒。CYP1A1 是芳烃受体(AHR)信号通路的经典下游效应分子,将环境配体与调控 I 相代谢并与 II 相结合反应通路协同的转录程序连接起来。其活性可通过生成反应性代谢物并调节氧化应激反应而影响细胞氧化还原平衡,进而与 DNA 损伤信号及炎症相关。CYP1A1 表达或活性的失调常被用作 AHR 通路受扰动的生物标志物,并与毒物易感性、致癌物代谢以及组织特异性的代谢适应研究密切相关。
CYP1A1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cyp1a1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cyp1a1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cyp1a1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cyp1a1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。