Date published: 2026-7-21

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CYP11B2双切口酶质粒(h): sc-405281-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CYP11B2 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • CYP11B2双切酶质粒(h)和CYP11B2双切酶质粒(h2)编码针对CYP11B2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    CYP11B2双切口酶质粒(h)

    sc-405281-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    CYP11B2双切口酶质粒(h2)

    sc-405281-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    CYP11B2 编码醛固酮合成酶,这是一种线粒体细胞色素 P450 酶,能够在肾上腺球状带细胞中催化将 11-脱氧皮质酮转化为醛固酮所需的末端氧化步骤。其活性将来源于胆固醇的类固醇生成与肾素–血管紧张素–醛固酮系统联系起来,整合了线粒体电子传递、依赖血红素的单加氧反应,以及对电解质与血压稳态的内分泌调控。CYP11B2 的表达或活性失调与醛固酮过多状态相关,包括原发性醛固酮增多症和分泌醛固酮的肾上腺腺瘤,并可促进心血管与肾脏的病理生理改变。作为盐皮质激素生物合成的标志物与驱动因子,CYP11B2 被广泛用于研究肾上腺细胞分化、血管紧张素 II 信号传导以及类固醇代谢通量。

    CYP11B2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYP11B2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYP11B2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYP11B2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYP11B2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。