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cyclin D2双切口酶质粒(h) | sc-401236-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cyclin D2双切口酶质粒(h2) | sc-401236-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CCND2 编码细胞周期蛋白 D2(cyclin D2),它是 CDK4/6 的调控伙伴,可通过促进视网膜母细胞瘤蛋白(RB)磷酸化及 E2F 依赖性转录来推动 G1 期进程。细胞周期蛋白 D2 整合来自 PI3K–AKT、RAS–MAPK 等通路的促有丝分裂信号,协调细胞进入细胞周期、增殖以及情境依赖性的分化程序。CCND2 的剂量或调控发生改变会扰动 G1/S 检查点,从而影响基因组稳定性与增殖能力。细胞周期蛋白 D2 信号失调与异常生长表型相关,并在肿瘤生物学、发育障碍以及内分泌和神经谱系模型中受到研究,因为这些体系中对 CDK4/6–RB 轴的调控至关重要。
cyclin D2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CCND2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCND2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CCND2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CCND2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。