Date published: 2026-7-21

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CUL-3双切口酶质粒(h): sc-416925-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CUL-3 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • CUL-3双切酶质粒(h)和CUL-3双切酶质粒(h2)编码针对CUL3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:CUL-3: sc-166110,通过WB, IF或者IHC分析
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    CUL-3双切口酶质粒(h)

    sc-416925-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    CUL-3双切口酶质粒(h2)

    sc-416925-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    CUL3 编码 Cullin-3(CUL-3),它是 CRL3 型 E3 泛素连接酶复合物的核心支架蛋白。CRL3 通过招募带有 BTB 结构域的底物适配蛋白,将特定底物导向依赖泛素的蛋白酶体降解。借助对信号转导与应激反应蛋白的受调控降解,CUL-3 有助于控制细胞周期进程、氧化应激通路(包括 KEAP1–NRF2)、细胞骨架动态以及先天免疫信号传导。CUL3 活性改变会重塑蛋白稳态与转录程序,从而影响与致癌信号、神经发育和细胞应激适应相关的通路。在人类遗传学中,CUL3 变异及 CRL3 失调与高血压相关机制以及更广泛的、与疾病相关的泛素信号变化有关。

    CUL-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CUL3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CUL3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CUL3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CUL3基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。