Date published: 2026-7-21

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CUL-3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-416925

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CUL-3 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在CUL-3基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:CUL-3: sc-166110,通过WB, IF或者IHC分析
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    CUL-3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-416925
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    CUL3 编码 Cullin-3(CUL-3),它是 CUL3–RBX1 型 E3 泛素连接酶复合物的核心支架蛋白。该复合物通过招募含 BTB 结构域的适配蛋白来赋予底物特异性,从而促进底物的泛素化并经蛋白酶体途径降解。通过对参与氧化还原稳态、细胞周期调控、细胞骨架动态以及应激信号传导等靶蛋白进行受调控的降解,CUL-3 有助于协调多条通路,例如泛素–蛋白酶体功能以及由 NRF2/KEAP1 介导的氧化应激反应。CUL3 依赖的泛素化过程一旦受到扰动,可能破坏蛋白质稳态及信号网络,进而影响炎症、代谢和基因组完整性。文献报道 CUL3 活性失衡及其与适配蛋白相互作用的改变与肿瘤相关通路,以及心血管和神经发育疾病机制有关,提示其可作为通路解析的关键节点。

    CUL-3 CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CUL3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对CUL3基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏CUL3开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使CUL-3蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建CUL3缺失的细胞模型,用于CUL-3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 CUL-3 功能至关重要的 CUL3 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 CUL3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 CUL-3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 CUL-3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CUL3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 CUL-3 HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 CUL-3 HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由CUL3同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CUL3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。