Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CTLA-4 Antibody (F-8) Alexa Fluor® 488: sc-376016 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of CTLA-4 expression in ALL-SIL (A) and CCRF-CEM (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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CTLA-4双切口酶质粒(h): sc-400948-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CTLA-4 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CTLA-4双切酶质粒（h）和CTLA-4双切酶质粒（h2）编码针对CTLA4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CTLA-4: sc-376016，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CTLA-4双切口酶质粒(h) | sc-400948-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CTLA-4双切口酶质粒(h2) | sc-400948-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CTLA4 编码 CTLA-4，这是一种抑制性免疫检查点受体，主要表达于活化 T 细胞和调节性 T 细胞（Treg）。它通过与 CD28 竞争结合抗原呈递细胞（APC）上的 CD80/CD86，从而限制 T 细胞的启动（priming）。通过减弱近端 TCR 信号以及下游依赖 PI3K–AKT 和 NF-κB 的转录程序，CTLA-4 有助于维持外周免疫耐受，并限制过度的细胞因子产生。CTLA-4 的遗传或功能异常与免疫失调和自身免疫相关，而 CTLA4 活性的改变也会影响肿瘤微环境中的肿瘤免疫逃逸动态。因此，CTLA4 被广泛用于研究调控 T 细胞激活阈值、Treg 抑制功能以及淋巴细胞稳态的相关通路。
CTLA-4 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CTLA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTLA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CTLA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CTLA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。