Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CtIP Antibody (D-4) HRP: sc-271339 HRP. Direct western blot analysis of CtIP expression in MCF7 whole cell lysate.
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CtIP双切口酶质粒(h): sc-401292-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CtIP 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CtIP双切酶质粒（h）和CtIP双切酶质粒（h2）编码针对RBBP8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CtIP: sc-271339，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CtIP双切口酶质粒(h) | sc-401292-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CtIP双切口酶质粒(h2) | sc-401292-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RBBP8 编码 CtIP，这是一种保守的 DNA 断端切除因子，可通过促进双链断裂的 5′–3′ 端加工并促进 RAD51 装载来协调同源重组的起始。CtIP 位于 DNA 损伤信号传导与细胞周期控制的交汇处，与依赖 BRCA1 和 MRN 的通路整合，调控检查点激活、复制叉稳定性，以及在同源重组与替代性末端连接之间的修复通路选择。由于其在维持基因组完整性中的作用，CtIP 活性异常与染色体不稳定性相关，并已在癌症生物学和抑癌网络的研究中受到关注。CtIP 依赖的切除过程也会影响类别转换重组及其他程序性 DNA 断裂过程，因此 RBBP8 是研究修复保真性与诱变的重要关键节点。
CtIP 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 RBBP8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RBBP8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏RBBP8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了RBBP8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。