Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CTH Antibody (F-1): sc-374249. Near-infrared western blot analysis of CTH expression in 293T (A), HeLa (B), K-562 (C) and U-87 MG (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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CTH双切口酶质粒(h): sc-401134-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CTH 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CTH双切酶质粒（h）和CTH双切酶质粒（h2）编码针对CTH的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CTH: sc-374249，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CTH双切口酶质粒(h) | sc-401134-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CTH双切口酶质粒(h2) | sc-401134-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CTH 编码胱硫醚 γ-裂解酶（cystathionine gamma-lyase），这是一种依赖磷酸吡哆醛（PLP）的转硫途径酶，可将胱硫醚转化为半胱氨酸、α-酮丁酸和氨，从而将蛋氨酸代谢与细胞内半胱氨酸的可用性连接起来。CTH 也参与内源性硫化氢（H2S）的生成，进而影响氧化还原稳态、线粒体生物能学以及炎症信号传导。通过在半胱氨酸与谷胱甘肽代谢中的作用，CTH 会影响多种细胞类型的氧化应激反应以及对铁死亡（ferroptosis）的易感性。在实验模型中，CTH 表达或活性发生改变与心脏代谢功能障碍、癌细胞代谢重编程以及与神经炎症相关的表型有关。
CTH 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CTH 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTH内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CTH的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CTH基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。