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CtBP1双切口酶质粒(h) | sc-400667-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CtBP1双切口酶质粒(h2) | sc-400667-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CTBP1 编码转录共抑制因子 CtBP1。CtBP1 是一种保守的调控蛋白,能够将 DNA 结合型抑制蛋白与染色质修饰复合物连接起来,从而塑造基因表达程序。CtBP1 通过与组蛋白去乙酰化酶(HDAC)及其他染色质重塑因子相互作用参与表观遗传调控,影响分化、凋亡和代谢适应等过程。作为一种对 NAD(H) 敏感的共调节因子,CtBP1 将细胞氧化还原状态与转录输出相整合,并参与包括 Wnt/β-连环蛋白和 TGF-β 相关转录网络在内的多条通路。CTBP1 活性异常与肿瘤生物学中的转录抑制失衡以及神经发育相关表型有关,因此在基因调控回路和疾病相关细胞状态研究中具有重要意义。
CtBP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTBP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTBP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTBP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTBP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。