Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
cSHMT Antibody (F-9): sc-514410. Western blot analysis of cSHMT expression in Hep G2 (A), NTERA-2 cl.D1 (B) and COLO 205 (C) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
cSHMT双切口酶质粒(h): sc-403678-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cSHMT 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- cSHMT双切酶质粒（h）和cSHMT双切酶质粒（h2）编码针对SHMT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cSHMT: sc-365203，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cSHMT双切口酶质粒(h) | sc-403678-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
cSHMT双切口酶质粒(h2) | sc-403678-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 SHMT1 基因编码细胞质丝氨酸羟甲基转移酶（cSHMT）。该酶依赖磷酸吡哆醛（PLP），可在丝氨酸与甘氨酸之间相互转化，同时生成 5,10-亚甲基四氢叶酸，为一碳代谢提供关键中间体。通过提供叶酸来源的碳单位，cSHMT 支持胸苷酸和嘌呤的生物合成、依赖 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）的甲基化能力，并通过与叶酸循环的耦联维持氧化还原稳态。因此，SHMT1 的活性与 DNA 复制和修复、表观遗传调控以及线粒体与细胞质之间的代谢协调密切相关。在细胞模型中，SHMT1 表达或功能的改变与增殖性疾病中观察到的叶酸通路失调有关，并与基因组不稳定相关表型的易感性相关。
cSHMT 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SHMT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SHMT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SHMT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SHMT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。