非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CSA 抗体 (D-2): sc-376981. Jurkat (A) 和 NIH/3T3 (B) 全细胞裂解液中 CSA 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CSA双切口酶质粒(h): sc-403428-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CSA 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CSA双切酶质粒（h）和CSA双切酶质粒（h2）编码针对ERCC8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CSA: sc-376981，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CSA双切口酶质粒(h) | sc-403428-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CSA双切口酶质粒(h2) | sc-403428-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ERCC8 编码人源 CSA 蛋白。CSA 是一种含 WD40 重复序列的因子，可与 DDB1、CUL4A 和 RBX1 共同组装形成 CRL4^CSA E3 泛素连接酶复合体，从而协调转录偶联型核苷酸切除修复（TC-NER）。CSA 通过招募修复与染色质重塑相关活性，并促进损伤应答组分的泛素依赖性周转，帮助解决导致 RNA 聚合酶 II 停滞的损伤。借由这些功能，CSA 维持基因组稳定性，促进紫外线诱导损伤后的转录恢复，并在基因毒性应激下维持细胞稳态。ERCC8 的致病性破坏与 Cockayne 综合征 A 组相关；该 DNA 修复疾病常被用作研究 TC-NER 缺陷、转录应激以及神经发育易损性的模型。
CSA 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ERCC8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ERCC8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ERCC8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ERCC8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。