Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Cryptic CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419633
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cryptic CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Cryptic基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cryptic CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-419633 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
小鼠 Cfc1 编码 Cryptic，这是一种属于 EGF-CFC 家族、通过 GPI 锚定于细胞膜表面的共受体，在胚胎早期发育过程中调控 NODAL 信号传导。Cryptic 支持依赖 SMAD2/3 的转录程序，这些程序决定左右轴的建立、原肠胚形成运动以及中胚层/内胚层（mesendoderm）模式化。在发育遗传学研究中，Cfc1 的破坏会扰乱 TGF-β 超家族通路的动态变化，并与左右位缺陷及先天性心脏畸形相关。作为一种与细胞表面相关的信号调节因子，Cryptic 为研究配体–受体复合体的组装以及情境特异性的 NODAL 反应性提供了一个便于切入的研究点。
Cryptic CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Cfc1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Cfc1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Cfc1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Cryptic蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Cfc1缺失的细胞模型，用于Cryptic信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Cryptic 功能至关重要的 Cfc1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Cfc1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Cryptic CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Cryptic CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Cfc1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Cryptic HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Cryptic HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Cfc1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Cfc1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。