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CPTI-M双切口酶质粒(h) | sc-401456-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CPTI-M双切口酶质粒(h2) | sc-401456-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CPT1B 编码肉碱棕榈酰转移酶 1B(CPTI‑M),这是一种与肌肉相关、定位于线粒体外膜的酶,催化长链酰基肉碱生成这一限速步骤,使其得以被转运进入线粒体并进行后续的 β‑氧化。通过控制脂肪酸进入线粒体基质,CPTI‑M 有助于调节脂质分解代谢、能量稳态,以及脂肪酸与葡萄糖之间的底物切换,并与 AMPK 信号、PPAR 驱动的代谢转录程序以及丙二酰‑CoA 介导的脂肪酸通量控制相互整合。CPT1B 活性或表达的改变与脂肪酸氧化失衡、脂毒性应激以及代谢重塑相关,这些过程与心代谢表型和肌肉能量学密切相关。在科研场景中,CPT1B 常用于线粒体功能、酰基肉碱谱分析、氧化能力评估,以及对营养可用性变化的代谢适应等研究。
CPTI-M 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CPT1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CPT1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CPT1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CPT1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。