
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CPS1双切口酶质粒(h) | sc-402014-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CPS1双切口酶质粒(h2) | sc-402014-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
氨甲酰磷酸合成酶1(Carbamoyl-phosphate synthase 1,CPS1)编码一种线粒体酶,催化尿素循环的限速步骤:在ATP依赖的反应中将氨和碳酸氢盐转化为氨甲酰磷酸。通过调控氮的清除以及精氨酸的生物合成,CPS1将线粒体代谢与肝细胞的解毒过程以及更广泛的氨基酸和核苷酸代谢网络联系起来。CPS1活性异常与高氨血症和尿素循环障碍相关,其表达也可在代谢性疾病和癌症中发生重塑,以适应氮处理方式的改变。这些特性使CPS1成为在人源细胞模型中解析线粒体氮通量、尿素循环调控以及代谢重编程的相关靶标。
CPS1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CPS1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CPS1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CPS1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CPS1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。