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Cox-2双切口酶质粒(m) | sc-422489-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cox-2双切口酶质粒(m2) | sc-422489-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ptgs2 基因编码环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)。Cox-2 是一种可诱导的限速酶,负责将花生四烯酸转化为前列腺素 H2,从而为下游多种前列腺素类介质提供底物,例如可调控血管张力、疼痛敏化以及免疫细胞行为的 PGE2。Cox-2 的表达会在炎症刺激下迅速上调,这些刺激包括由细胞因子和 Toll 样受体触发、经 NF-κB 与 MAPK 等信号通路传递的炎症信号,从而将先天免疫激活与脂质介质的生物合成联系起来。通过影响前列腺素信号,Cox-2 可调控白细胞募集、细胞因子产生、血管生成以及组织重塑。Ptgs2 活性失衡在慢性炎症、促肿瘤微环境,以及神经炎症与代谢应激等情境的模型研究中被广泛关注。
Cox-2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ptgs2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ptgs2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ptgs2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ptgs2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。