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COL3A1双切口酶质粒(h) | sc-400356-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
COL3A1双切口酶质粒(h2) | sc-400356-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
COL3A1 编码 III 型胶原的前 α1 链(pro-α1 chain)。III 型胶原是一种主要的纤维状胶原,可组装成细胞外基质(ECM)纤维,并有助于决定组织的顺应性和抗拉强度。III 型胶原在血管壁、皮肤、肺以及中空器官中含量丰富,在这些组织中,它通过整合素(integrins)和 ECM 重塑酶介导的信号,与细胞-基质相互作用协同调控基质组织结构。COL3A1 的功能与细胞外基质装配、TGF-β 调控的促纤维化程序以及伤口修复过程相互交织,这些过程共同影响成纤维细胞活化与力学信号转导。COL3A1 表达或结构的失调与结缔组织和血管脆弱等表型相关,并常在与纤维化相关的重塑及 ECM 周转研究中受到关注。
COL3A1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。