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CNT1双切口酶质粒(h) | sc-404790-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CNT1双切口酶质粒(h2) | sc-404790-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SLC28A1 编码高亲和力、钠离子依赖的转运蛋白——集聚型核苷转运体 1(CNT1)。CNT1 介导嘧啶核苷(如尿苷和胞苷)跨质膜进入细胞。通过调控核苷挽救途径,CNT1 影响核苷酸库的稳态并支持 DNA/RNA 合成,从而将膜转运与复制、修复及细胞周期进程联系起来。CNT1 的活性还与更广泛的代谢程序相交汇,这些程序用于平衡核苷酸的从头合成与挽救合成;在多种组织背景中,其表达改变与上皮分化状态及增殖能力的变化相关。因此,SLC28A1 常被用于研究核苷转运生物学、代谢应激反应,以及在疾病相关模型中调控对核苷可用性敏感性的机制。
CNT1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC28A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC28A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC28A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC28A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。