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CNPase双切口酶质粒(h) | sc-402463-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CNPase双切口酶质粒(h2) | sc-402463-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CNP 基因编码 2′,3′-环状核苷酸 3′-磷酸二酯酶(CNPase),这是一种与髓鞘相关的酶,在少突胶质细胞和施万细胞中富集,能够将 2′,3′-环状核苷酸水解为 2′-核苷酸。CNPase 通过影响少突胶质细胞突起生长、细胞骨架动态以及质膜处与 RNA 相关的核糖核蛋白运输,支持髓鞘形成与维持。通过这些功能,CNPase 促进轴突—胶质细胞相互作用,并维持神经系统中致密与非致密髓鞘结构域的稳定性。CNP 表达或 CNPase 活性改变与脱髓鞘、白质功能障碍以及神经炎症相关情境有关,使该通路成为研究髓鞘完整性与神经环路稳定性机制的重要对象。
CNPase 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CNP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CNP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CNP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CNP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。