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CMTM4双切口酶质粒(h) | sc-405296-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
CMTM4双切口酶质粒(h2) | sc-405296-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CMTM4(CKLF样 MARVEL 跨膜结构域含有蛋白4)是一种多跨膜蛋白,定位于内体和质膜等区室,参与膜结构的组织与囊泡运输。通过其 MARVEL 结构域,CMTM4 与受体周转和稳定性的调控有关,其中包括通过影响 PD-L1 的细胞表面表达来调节免疫检查点信号。这些作用使 CMTM4 处于内吞作用、膜动态变化以及影响细胞—细胞相互作用的免疫相关信号通路的交汇点。CMTM4 的表达或功能失调已在肿瘤免疫逃逸及更广泛的免疫调控表型研究中被关注,因此在肿瘤学与免疫学模型的机制研究中具有重要意义。
CMTM4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CMTM4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CMTM4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CMTM4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CMTM4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。