Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CLN2 Antibody (G-3): sc-393961. Western blot analysis of CLN2 expression in THP-1 (A) and KNRK (B) whole cell lysates.
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CLN2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405204
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CLN2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在CLN2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CLN2: sc-393961，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CLN2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-405204 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
TPP1 编码三肽基肽酶1（tripeptidyl peptidase 1，CLN2），这是一种溶酶体丝氨酸蛋白酶，在溶酶体内蛋白质周转过程中从多肽的 N 端切除三肽。CLN2 的活性支持溶酶体依赖的分解代谢过程，并与自噬–溶酶体通量、内体–溶酶体运输以及在代谢活跃细胞类型中的蛋白质稳态维持相交汇。TPP1 功能丧失会破坏溶酶体蛋白水解并增加神经元易损性；其致病变异与 CLN2 相关的神经元蜡样脂褐素沉积症以及更广泛的溶酶体贮积性病理有关。因此，TPP1/CLN2 被广泛用于研究溶酶体功能、应激反应，以及将降解受损与细胞功能障碍相联系的机制模型。
CLN2 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TPP1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TPP1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TPP1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使CLN2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TPP1缺失的细胞模型，用于CLN2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 CLN2 功能至关重要的 TPP1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TPP1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 CLN2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 CLN2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TPP1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 CLN2 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 CLN2 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TPP1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TPP1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。