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CLK2慢病毒激活颗粒(h) | sc-403326-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
人源 CDC-like kinase 2(CLK2)是一种双特异性丝氨酸/苏氨酸激酶,可对富含 SR 的剪接因子进行磷酸化,从而协调剪接体动态以及 pre-mRNA 的可变剪接。CLK2 的活性将转录与 RNA 加工联系起来,并参与调控细胞周期进程和应激响应信号传导,包括调节 RNA 代谢与激酶网络的相关通路。CLK2 表达或信号传导失调与癌症及其他以基因表达调控异常为特征的疾病中观察到的异常剪接程序有关。由于剪接选择会塑造蛋白质组多样性,CLK2 常被用于研究磷酸化依赖的剪接调控如何影响细胞表型。
CLK2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CLK2 表达。
CLK2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CLK2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CLK2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CLK2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。