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CLIP4慢病毒激活颗粒(h) | sc-413231-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 CLIP4(含 CAP-Gly 结构域的连接蛋白 4)编码一种微管相关因子,可通过与微管正端动态的相互作用,参与协调细胞骨架组织与细胞内运输。通过影响微管稳定性以及依赖运输的过程(如细胞极性与细胞分裂),CLIP4 可能调控将细胞骨架重塑与信号转导和细胞器定位相耦联的通路。已有研究在增殖状态和应激适应等不同细胞状态中观察到微管调控蛋白(包括 CLIP 家族成员)表达模式的改变,这支持在细胞迁移、有丝分裂保真性和基因组稳定性等情境下进一步研究 CLIP4。上述生物学特征使 CLIP4 成为在人类细胞中开展微管依赖性调控机制研究的一个有用靶点。
CLIP4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CLIP4 表达。
CLIP4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CLIP4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CLIP4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CLIP4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。