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claudin-6双切口酶质粒(h) | sc-403405-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
claudin-6双切口酶质粒(h2) | sc-403405-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类基因 CLDN6 编码 claudin-6,这是一种四次跨膜蛋白,是紧密连接(tight junction)链条的组成成分,可调控旁细胞通透性以及上皮屏障完整性。Claudin-6 通过与 ZO 家族等支架蛋白相互作用,参与连接复合体的组织与细胞极性程序,将膜结构特征与细胞骨架动力学联系起来。其表达受发育过程调控,且常与上皮分化状态相关,因此 CLDN6 常被用作谱系与细胞状态研究的标志物。紧密连接信号异常及 claudin 表达模式改变被广泛认为与上皮重塑以及肿瘤相关的黏附、侵袭和屏障功能变化有关,这也支持在疾病相关模型中对 CLDN6 进行研究。
claudin-6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CLDN6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CLDN6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CLDN6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CLDN6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。