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Clathrin Light Chain A/CLTA双切口酶质粒(h) | sc-403962-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Clathrin Light Chain A/CLTA双切口酶质粒(h2) | sc-403962-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CLTA 编码网格蛋白轻链A,是网格蛋白包被囊泡的核心组成部分。在内吞过程中,CLTA 与网格蛋白重链协同,调控网格蛋白晶格的组装与动态变化。CLTA 支持受体介导的内化、突触囊泡再循环,以及质膜、内体与反式高尔基网络之间的转运,因此与调控膜组成及信号衰减的通路相关。通过参与货物分选与内体运输路径的选择,CLTA 会影响生长因子受体、免疫受体等受体的周转,从而塑造下游信号传导与细胞稳态。网格蛋白介导的转运失调与神经退行性过程、代谢信号异常,以及与癌症相关的受体再循环和营养摄取改变有关,因此 CLTA 是研究囊泡生物学机制的一个有用节点。
Clathrin Light Chain A/CLTA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CLTA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CLTA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CLTA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CLTA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。