
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cingulin双切口酶质粒(h) | sc-404409-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Cingulin双切口酶质粒(h2) | sc-404409-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CGN 编码 cingulin(紧密连接蛋白),这是一种细胞质支架蛋白,富集于紧密连接处,负责将跨膜连接组分与皮层肌动蛋白细胞骨架连接起来。Cingulin 通过调控连接体装配、细胞极性以及细胞骨架组织,协调上皮屏障的形成与维持,并与调节连接张力及 Rho 家族 GTPase 活性的信号通路发生互作。通过这些作用,CGN 影响极化上皮与内皮中的旁细胞通透性和组织稳态。在与屏障功能障碍、炎症以及上皮重塑相关的复杂疾病表型研究中,紧密连接结构的改变及 cingulin 相关调控网络常被重点关注。
Cingulin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CGN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CGN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CGN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CGN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。