Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CIN85 Antibody (C-8): sc-271567. Western blot analysis of CIN85 expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human CIN85 transfected: sc-175351 (B) 293T whole cell lysates.
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CIN85双切口酶质粒(h): sc-402573-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CIN85 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CIN85双切酶质粒（h）和CIN85双切酶质粒（h2）编码针对SH3KBP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CIN85: sc-166862，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CIN85双切口酶质粒(h) | sc-402573-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
SH3KBP1 编码 CIN85，这是一种多适配子支架蛋白，可通过与 Cbl 泛素连接酶及内吞相关机器相互作用，在受体酪氨酸激酶（包括 EGFR）下游组装复合物，从而协调内吞转运并促使信号衰减。CIN85 依靠其 SH3 结构域及与富脯氨酸序列的结合界面，调控受体的内化、泛素化以及溶酶体分选，从而塑造 MAPK 与 PI3K-AKT 信号的强度与持续时间。CIN85 还参与细胞骨架重塑、侵袭足（invadopodia）形成及囊泡动力学等过程，这些过程与多种疾病背景下的细胞迁移和侵袭性表型相关。CIN85 相关通路的失调已在致癌信号传导、免疫受体周转以及膜转运异常等方面得到研究。
CIN85 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SH3KBP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SH3KBP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SH3KBP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SH3KBP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。