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Chitotriosidase双切口酶质粒(h) | sc-402112-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Chitotriosidase双切口酶质粒(h2) | sc-402112-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CHIT1 编码人源几丁三糖苷酶(chitotriosidase),这是一种分泌型糖苷水解酶,主要由活化的巨噬细胞及其他髓系细胞产生,可降解类似几丁质的多糖,并参与先天免疫防御。CHIT1 与溶酶体和吞噬溶酶体生物学、巨噬细胞活化程序,以及慢性炎症过程中伴随发生的细胞外基质相关重塑过程密切相关。CHIT1 表达或活性改变常被用作评估巨噬细胞负荷与炎症状态的分子读出指标,而人群中的 CHIT1 遗传变异也会影响该酶的功能。因此,CHIT1 与肉芽肿性疾病和溶酶体贮积病、气道炎症与重塑,以及更广泛的免疫代谢调控与组织稳态研究均具有相关性。
Chitotriosidase 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CHIT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHIT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CHIT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CHIT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。